肝素是如何提取和制作的？

取100kg新鲜肠粘膜(总固形物的5%-7%)，加入200ml苯酚。

(0.2%)，如果温度低，可以不加。搅拌下加入0.5-1千克(0.5%-1%)的胰糜。

使用

将300-400g/L(30%-40%)NaOH溶液的pH值调至8.5-9，升温至40-45℃，保温2-3小时。PH8，加入5kg原盐(5%)，升温至90℃左右，使用6 mol/L

用HCl调节pH值至6.5左右，停止搅拌，保温20min，用布袋过滤，得到酶解滤液。

二、盐分解-树脂法

画

将新鲜猪肠粘膜放入反应罐中，加入30g/L(3%)氯化钠，用NaOH调节pH至9，逐渐升温至50-55℃。保温2小时，继续升温至95℃，保温65438±00分钟，冷却至50℃以下，用30目双层纱布过滤，收集滤液。

猪肠粘膜[NaCl；；NaOH]→[pH9；50-55℃]滤液吸附、洗涤、洗脱和沉淀。

取冷却至50℃以下的滤液，加入714型(强碱性)Cl型树脂(新树脂用量为2%)，搅拌8小时，然后静置过夜。

三。CTAB*提取方法

(*十六烷基三甲基溴化铵是一种长链季铵盐)萃取和络合

按照猪肠粘膜液(V): Na2SO4 (m):硫酸铝(m):CTAB(V)= 1:0.15:0.04:0.001的比例。

将新鲜猪肠粘膜放入反应罐中，边搅拌边加入硫酸钠，溶解，用碱溶液调节pH至11-11.5，升温至50℃，保温搅拌2小时。加入硫酸铝，溶解，用氢氧化钠调节pH值至7.5-8，加热至95℃，保温65438±00分钟。

扩展数据:

肝素的检测:

1、APTT

APTT仍然是监测UFH的选择之一。这是一个非常简单，快速和廉价的项目。但是，很难标准化。APTT检测要求整个凝血级联中的所有蛋白质都是完整的，以便可以准确测量肝素水平。

2、硫酸鱼精蛋白中和试验。

该实验的原理是，UFH，一种带高度负电荷的分子，被带正电荷的蛋白质硫酸鱼精蛋白中和。向血浆中加入不同浓度的硫酸鱼精蛋白，然后加入凝血酶，测量凝血时间。将凝血酶的凝固时间恢复到正常的硫酸鱼精蛋白浓度被认为是肝素的浓度。

3.抗Xa活性的检测

发色底物法检测肝素抗Xa活性的原理是一样的:样品中的肝素与AT形成复合物，抑制Xa因子的过量加入。剩余因子Xa的活性通过其与特定底物的相互作用释放pNA来测定。

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