急！平端连接问题

对于平端连接，必须使用大量的靶片段来竞争载体的自我连接。一般需要保证你的片段与你的载体的摩尔比在8: 1以上，才能达到更高的连接效率。

在10μ l的体系中，T4连接酶通常使用0.5μ l..然后你只要把你的片段和载体按照10: 1的摩尔比相加，用水补足体积。

另外，平端连接失败的主要原因是载体的自连接非常严重。可以用磷酸酶处理载体使其去磷酸化，即去掉载体末端的磷酸基团，这样可以大大降低载体自连接的概率，增加连接的成功率。