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反相离子对高效液相色谱(RP-HPIPC)开发了一种流动相分步优化方法，用于分离肝素衍生寡糖的复杂混合物，其中离子浓度与试剂相匹配，流动相的pH值和乙腈浓度发生变化。该决议

在优化的条件下，在不到30分钟的分析时间内，获得了30多种寡糖组分。超过30种低聚糖组分，优化分析时间小于30分钟。这是第一个可以在一个色谱步骤中分离大小硫酸寡糖复杂混合物的RP-HPLC方法。这是第一个反相高效液相色谱，可以在一个色谱步骤中分离大小硫酸寡糖的复杂混合物。在该混合物中，也可以使用肝素衍生的寡糖，在该混合物中，也可以使用canalsobe肝素寡糖。

在第二组RP-HPIPC条件下使用挥发性离子对试剂乙酸三丁基铵进行分离，以帮助回收单个硫酸化寡糖。下一个反相HPIPC条件的第二组使用挥发性离子对试剂，三丁基铵乙酸，分别帮助回收单个硫酸化寡糖。此外，可以替换氯化钠梯度，此外，可以替换氯化钠梯度，

使用固定的低浓度挥发性盐乙酸铵，通过利用乙酸盐梯度，对高硫酸化寡糖进行电泳。有必要洗脱高度硫酸化的寡糖，并使用具有固定湍流盐、低浓度乙酸铵的乙腈梯度。该溶剂系统可以使这种RP-HPIPC分离与质谱分析直接对接成为可能。因此，这种溶剂系统可以直接连接质谱反相HP IPC分离。

关键词:离子对试剂；梯度洗脱；寡糖关键词:离子对试剂；梯度洗脱；寡糖