DNA测序的原理?基因组测序的原理是什么?
我也这么认为
DNA测序可分为人工测序和自动测序。手工测序包括桑格双脱氧链终止法和无极生组合-吉尔伯特化学降解法。自动化测序实际上已经成为DNA序列分析的主流。自动测序是在Sanger方法的基础上发展起来的。
DNA测序的原理应该回答无极生组合-吉尔伯特化学降解的原理,桑格双脱氧链终止法和现在发展起来的焦磷酸化测序。
如果最常用的测序原理是自动测序:用毛细管电泳技术代替传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用本公司专利的带四色荧光染料的ddNTP(标记终止子法),那么通过单引物PCR测序反应,生成的PCR产物是3’端带四种不同荧光染料的单链DNA混合物,相差1个碱基,这样四种荧光染料的测序PCR产物就可以在一个毛细管中电泳,避免了单引物PCR测序的需要。由于分子大小不同,毛细管电泳中的淌度也不同。当分子通过毛细管读数窗时,激光检测器窗口中的CCD(电荷耦合器件)摄像检测器可以逐个检测荧光分子。激发的荧光被光栅分割,以区分代表不同基底信息的不同颜色的荧光,图像在CCD相机上同步。分析软件可以自动将不同的荧光转换成DNA序列,从而达到DNA测序的目的。
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基因组测序的原理包括样品制备、大规模测序和序列分析。
见/teq/454-GS _ flx.shtml。