辽宁省农业科学院大连生物技术研究所科技成果
柞蚕核型多角体病毒载体表达系统的构建
柞蚕NPV载体表达系统的基因工程研究始于1985。经过多年的努力,克隆了柞蚕NPV多角体蛋白基因,并进行了DNA序列分析,确定了基因的转录起始位点,构建了转移表达载体。同时,建立了对柞蚕NPV敏感的蚕蛹精巢细胞系。1992成功实现了外源基因在昆虫细胞和柞蚕蛹中的表达,初步建立了柞蚕NPV载体表达系统。同年申请国家发明专利,并于1997获得国家专利局专利授权(专利号92103655.8)。该所研究人员分析鉴定了柞蚕蛹抗菌活性物质的主要成分,包括抗菌肽A、B、D、溶菌酶和凝固素。分离和纯化这些蛋白质并分析它们的性质。阐明了抗菌活性物质与柞蚕品种的关系,为柞蚕抗病育种提供了理论依据。
九乳天宝口服液是以雌蚕蛾为原料研制而成,用于治疗老年前列腺肥大和女性更年期综合症。上述两种产品已成功转让给海南新安生物工程制药有限公司,并取得了可喜的经济效益。
经过培养和筛选,可连续传代培养的家蚕精巢细胞系已稳定地传至近百代。ApNPV感染细胞实验表明,约60%的传代细胞可被ApNPV感染。用ApNPV-DNA进一步转染也是成功的。家蚕精子细胞系的建立在国内外尚属首次报道。昆虫抗菌肽具有很强的抗菌、抗病毒和免疫功能。常用作离体杀菌剂,用于植物转基因抗菌育种。为了满足这一需求,根据昆虫抗菌肽B基因的序列,通过人工化学合成的方法合成并克隆了昆虫抗菌肽B基因,为下一步的研究奠定了基础。