援助ELISPOT读者(援助elispot读者)
抗原刺激的淋巴细胞局部产生细胞因子，细胞因子被ELISPOT板底部PVDF膜上的特异性单克隆抗体(预包被)捕获。去除细胞后，捕获的细胞因子与生物素标记的单克隆抗体结合，然后与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的抗生物素蛋白结合。加入底物后PVDF膜上出现紫色或红棕色斑点，说明细胞产生了细胞因子。斑点由ELISPOT读数器自动计数和分析。
德国AID公司多年来一直专注于酶联免疫斑点分析仪的研发。自20世纪90年代以来，AID公司为世界各地的科研、临床和制药实验室提供了大量的酶联免疫斑点阅读器。其在各个领域的应用随处可见，已经成为全世界科研人员认可的品牌。
利用AID酶联免疫斑点分析仪对ELISPOT板上各孔的斑点图像进行自动采集、统计和分析，不仅可以自动获得斑点数量并给出细胞因子的分泌活性值，还可以根据预先设定的判读规则直接获得阴性和阳性结果，并将结果输出到JPG、EXCEL、TXT、PPT等。它还可以连接到实验室的LMS系统进行数据管理和输出，从而成为一个可靠的ELISPOT分析工具。
此外，传统的ELISPOT也有局限性，缺乏对T细胞产生的多种细胞因子的同时检测。为了克服这个问题，基于荧光标记，开发了荧光免疫斑点分析(荧光斑点)。这种新的荧光免疫印迹分析技术可用于在单细胞水平上检测表达多种细胞因子的淋巴细胞，如表达IFN-γ(绿色荧光标记)和IL-2(红色荧光标记)的T细胞。
德国AIDSPOT Reader首次实现了应用一台酶联免疫斑点分析仪同时分析传统ELISPOT和荧光免疫斑点荧光斑点:AIDSPOT Reader采集ELISPOT板每个孔上的绿色荧光斑点(FITC标记的IFN-γ)图像和红色荧光斑点(Cy3标记的IL-2)图像各一幅，并通过FluoroAID专利的荧光图像叠加技术将两幅图像融合，保证了* * *染色斑点计数的准确性。
AID酶联免疫斑点分析仪采用世界著名的ELISPOT试剂生产商瑞典Mabtech公司的产品，可用于人、猴、鼠、鼠细胞等物种，以及兽医领域，检测牛、羊、马、猪等样本的T/B细胞免疫应答。除了IFN-γ和白细胞介素系列，还有TNF-α、穿孔素、颗粒酶B和MIP-1β。
①人:apoE、GM-CSF、颗粒酶B、IFN-α (Subt.2，8，10，14，17)、IFN-α(pan特异性)、IFN-γ、IL-1β。IL-12/-23(p40)、IL-12(p70)、13、17A、21、23、31、MIP-1β、穿孔素、TNF-α；
②猴:IFN-γ、IL-2、IL-17；
③小鼠:GM-CSF、IFN-α、IL-4、5、6、IL-12/-23(p40)、IL-13、IL-21、MIP-1β、穿孔素、TNF。
④其他:莱姆病斑、EBV-Spot、CMV-Spot、Trans Spot试剂盒；
⑤有关更多T细胞/B细胞ELISPOT和荧光斑点试剂盒，请咨询。
灵敏度高:20-30万中1阳性细胞检出率；
直观可靠:单细胞水平检测，一个阳性细胞有一个斑点，斑点的数量代表细胞分泌细胞因子的数量，斑点的大小代表细胞分泌细胞因子的水平；
高通:一个ELISPOT板可以用于96次测试，研究人员每天可以检测数百个样本。只需少量细胞，如45毫升血液，就足以测试600种不同抗原/肽的反应。
活细胞的功能检测:被检测的细胞因子并不存在，而是在检测过程中通过外加刺激而分泌的；
临床实验适用:经过冻存复苏的细胞不丧失免疫功能，这对临床试验非常重要。处理前后的样本可以平行检测，结果可以重复；如果试验涉及多个临床机构，可以将血样冷冻后运送到核心实验室进行检测。
ELISPOT不仅用作科学研究工具，还用于临床诊断。最近，第一个诊断平台(T-Spot。TB)由SFDA根据ELISPOT方法批准上市。这种检测结核感染的试验方法是通过测量结核特异性抗原刺激的IFN-γ分泌来检测特异性T细胞免疫反应。它可以代替传统的皮试，并大大提高敏感性和特异性，且不受卡介苗接种的影响。ELISPOT还可用于抗感染免疫研究和其他传染病的诊断，如乙型肝炎、丙型肝炎、EB病毒、巨细胞病毒和莱姆病。
ELISPOT法是国际公认的检测和评估疫苗细胞免疫水平的标准工具。在国际上，IFN-γ ELISPOT法在HIV疫苗研究中被广泛用于监测免疫反应，ELISPOT法在国际艾滋病疫苗行动计划中被用于在大量试验中评估T细胞的功能以监测新的HIV疫苗候选物。ELISPOT方法通过测量疫苗诱导强T细胞反应的能力来定义疫苗的效果。ELISPOT法可用于疫苗开发和设计中筛选和确定抗原的特异性T细胞表位。这些信息也可用于评估适当的免疫策略和免疫途径。
中国药品生物制品检定所在《预防性DNA疫苗临床前研究技术指南》和《预防以病毒为载体的活疫苗制剂技术指标原则》中指出，ELISPOT法是检测和评价疫苗细胞免疫效价的有效方法。ELISPOT技术作为一种更敏感的检测T/B细胞特异性分泌的方法，对检测少量抗原特异性记忆T细胞尤为重要，已广泛应用于预防性疫苗和治疗性疫苗的研制和评价，如艾滋病疫苗、乙肝疫苗、流感疫苗和各种肿瘤疫苗。
根据检测到的不同细胞因子，ELISPOT可用于区分不同的活化T细胞亚群。如Th1细胞主要分泌IFN-γ、IL-2、TNF-α，其他细胞因子如IL-4、IL-5、IL-13一般由Th2细胞分泌。变态反应研究中的一个热点是通过ELISPOT测定Th2细胞因子，因为Th2反应是变态反应的主要反应，但它通常以低频率发生，并且需要高灵敏度的方法才能成功检测。
在针对特定过敏反应的免疫疗法中监测T细胞免疫反应；在细胞介导的体外检测和诊断接触性变态反应的应用中，ELISPOT方法越来越受到变态反应工作者的关注。因为对于诸如IL-4(Th2型反应的主要细胞因子)之类的因子，其总是难以通过其他方法(例如流式细胞术和ELISA)来检测，所以通过使用高灵敏度的ELISPOT方法来研究过敏原特异性免疫反应尤为重要。
ELISPOT技术还广泛应用于自身免疫性疾病的诊断和病因学研究，如I型糖尿病、多发性硬化、重症肌无力和系统性红斑狼疮等疾病的病因学分析，疾病预测、早期诊断、指导治疗和预后分析。
虽然ELISPOT主要用于T和B细胞分析，但它也适用于任何想要在单细胞水平上研究蛋白质分泌的实验。该方法特别适用于那些效应细胞数量至关重要或具有生物学意义的实验，如LPS刺激PBMC后分泌IL-6和IL-1β的单核细胞的定量分析；此外，它还特别适合于研究数量特别少的分泌细胞，如浆细胞样树突状细胞，这种细胞在血液中特别少，但它们活化后分泌的IFN-α可以很容易地被ELISPOT检测到。
例如
药物筛选:化合物的筛选和药物的免疫反应；
肿瘤免疫研究:已用于分析评价肿瘤患者体内诱导肿瘤特异性T细胞的疫苗试验。治疗前后特异性细胞免疫应答水平的检测可有效评价治疗效果，为治疗和用药提供重要参考信息。
移植免疫研究:移植排斥反应的预测。
自上市以来，全球已有超过65，438+0，500个实验室在使用AID的酶联免疫斑点分析仪。AID ELISPOT阅读器的硬件和软件完全符合欧盟ce认证、FDA 21 CFR Part 11规范和GMP/GLP标准。
散斑图像采集和计数
全自动读数板，自动采集每个孔的图像；自动计算斑点数量和斑点相关信息，如大小、面积、光密度等。内置不同因子参数设置，直接调用；CountAID功能有助于优化读取参数，并具有智能参数记忆功能。
结果分析
直接判断阴阳测试结果；诊断模块AIDiagnostic，适用于为临床诊断解释ELISPOT实验的结果，并分别输出每个患者的散斑图像和结果报告；统计分析每个孔中斑点的分布，比较免疫反应，细胞因子分泌的定量比较等。
数据输出和质量控制
可以输出单孔图像、任意孔图像和整板图像；多种保存格式，Excel，Txt，PPT等。输出数据可以定制为包括点号、SFU、光密度强度、活动性、点分布图等。包括质量控制模块，自动记录操作历史，符合GLP规范。
荧光双色ELISPOT分析-Fluorospot，采用专利的荧光图像叠加技术，确保对多色因子* * *分泌斑点的准确识别，避免酶标双色检测中不同细胞因子分泌不均匀导致的误判。4-8位滤光轮，全自动切换，至少标配FITC和Cy3荧光滤光片，其他波长可以添加。
全自动翻译
ISpot将平板上每个孔中各种颜色的荧光点分别成像，如检测FITC标记的IFN-γ和Cy3标记的IL-2的分泌，软件自行叠加不同的荧光图像，准确识别* * * (IFN-γ&: IL-2)细胞的分泌。整个过程全自动，无需人工干预。
性能稳定，兼容性和扩展性好
高能激发保证微弱荧光信号检测，窄带滤光片保证特定信号检测，多色扩展只需配滤光片。
技术进步
世界上第一台上市的酶联斑点分析仪，1996发明了“ELISPOT法检测血细胞活性”专利；唯一专利PCT/EP2008/009112 ‐氟酸是基于荧光滤光片的荧光多色ELISPOT检测系统。
学术出版权威
从2007年荧光产品上市到现在，80%关于荧光ELISPOT应用的SCI文献都是由AID发表的，是公认的荧光检测的较好选择。
国际认可度高
它是与牛津大学牛津免疫学实验室密切合作开发的，是结核病T-Spot诊断的专用工具。国际艾滋病疫苗行动组织(IAVI)指定品牌；世界知名的ELISPOT试剂盒开发实验室(如瑞典Mabtech)专用品牌。
请联系我们13521452266申请AID酶联免疫斑点分析仪的试用。
——德国援华一级代理，北京泽平