乳糜状指甲的测定

目的:探讨高脂乳糜对凝血功能的影响。方法:收集两份高脂乳糜血，一份用室温高速离心法分离，另一份用常规低速离心法分离。然后用Sysmex CA7000血凝分析仪测定脱脂乳糜血浆和原浆的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(fibrinogen)。同时用手工法测定血浆中的PT、APTT、TT和FIB，并对结果进行比较。结果:Symex CA 7000血凝仪测定的原料血浆P<和FIB与Symex CA 7000血凝仪测定的去脂乳糜血浆和手工测定的结果有显著性差异(P < 0.01)，APTT与TT无显著性差异(P & gt0.05);Sysmex CA7000血凝仪测定结果与手工法比较，PT、APTT、FIB、TT无显著性差异(P & gt0.05)。结论:高脂肪乳糜对血凝仪测定PT和FIB有严重影响。室温下高速离心可消除高脂肪乳糜对测定结果的影响。

乳糜血；凝血酶原时间；部分活化凝血酶时间；凝血酶时间；纤维蛋白原；血液凝固分析仪

凝血功能是临床实验室的常规检查项目，一般包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间等凝血因子的测定。用于术前检查，监测血栓形成和DIC治疗中抗凝剂的使用，是急诊检查项目之一[1]。经典的凝血因子测定方法是手工法，但操作复杂、效率低，不能满足临床大批量样本测定的需要。随着实验室检测技术的发展，全自动凝血分析仪已被用于临床实验室批量检测凝血功能。凝血分析仪的结果容易受到高脂乳糜血的干扰，高脂乳糜血的样本需要人工方法测定，给工作带来不便。本文讨论了高脂肪乳糜对凝血分析仪测定结果的影响，以及消除脂肪乳糜干扰的方法，报告如下。

1材料和方法

1.1样本

乳糜血浆来自我院2006年6月至2006年2月的门诊和住院患者共45例。用真空抗凝管(含109 mmol/L柠檬酸钠0.2 ml)作凝血功能，静脉采血1.8 ml，4小时内完成测定。

1.2仪器

SYSMEX CA-7000血凝分析仪，日本产；TGL-16C台式普通高速离心机。

1.3试剂

采用SYSMEX CA？7000血凝仪原装试剂和质控品。

1.4方法

1.4.1无脂乳糜浆液的制备

收集明显高脂乳糜血液样品的凝血功能，以3 000 r/min离心65438±00min获得原生质体。标本被分成两部分。一部分以13 000 r/min离心10 min，下层血浆清澈，为无脂乳糜尿血浆。仪器测定用SYSMEX CA-7000血凝仪测定脱脂乳糜尿血浆和原血浆的PT、APTT、FIB和TT。用手工法测定原血浆中的PT、APTT、FIB、TT，重复测定2 ~ 3次，取平均值。

1.4.2数据处理方法

所有实验数据用S表示，用配对t检验分析。

2个结果

仪器法测定原血浆结果、脱脂乳糜尿血浆结果、手工法测定原血浆结果见表1。表1脱脂乳糜血浆和原血浆中PT、APTT、FIB、TT的测定结果(略)注:#符号表示不能检出特异性结果，结果为0；*与手工法和仪器法去除乳糜血浆中的脂肪相比，P < 0.05438+0。

从表1可以看出，仪器法测定原血浆PT和FIB的结果、仪器法测定脱脂乳糜尿血浆的结果和手工法测定原血浆的结果之间有统计学差异(P ﹤ 0.05438+0)，但APTT和TT之间没有统计学差异(P & gt0.05);与手工法比较，PT、APTT、FIB和TT无显著性差异(P & gt0.05)。

3讨论

凝血因子PT、APTT、FIB、TT是判断临床凝血功能的常规项目，是术前筛查凝血功能异常的必要项目，也是血栓前状态的检查、弥散性血管内凝血出血(DIC)的实验诊断、各种抗凝药物的用药指导和预后估计等诊断项目，在临床疾病的诊断和治疗中具有重要价值。测定凝血因子的经典方法是手工法，国际权威学术组织如国际血液学标准化委员会(ICSH)、国际血栓与止血委员会(ICTH)和美国临床实验室标准委员会(NCCLS)都制定了标准化的测定方案。然而，由于操作程序复杂、效率低，手工方法无法适应大医院大批量标本的检测。因此，全自动凝血分析仪测定凝血因子是解决大批量样本测定问题的关键手段，已在各级医院广泛应用。

目前，全自动血凝仪按测定原理可分为机械振动法和光电比浊法。光电比浊法的原理是当一束光(光源卤素灯)通过样品杯时，会被透射和散射。血浆在样品杯中凝固过程中，纤维蛋白原会逐渐转变为纤维蛋白，其物理性质会发生变化，导致透射光和散射光的强度发生变化，从而判断凝固终点[2]。Sysmex CA7000血凝分析仪就是这样一种仪器，由于其测定成本低，对正常外观样本的准确度和精密度高，被广泛应用于临床实验室。从我们的结果可以看出，高脂乳糜对Sysmex CA7000血凝仪测定PT和FIB的结果有明显的影响，可使FIB无法测定结果，PT测定结果偏高。这是因为脂肪性乳糜使血浆浊度过高，超出了仪器的检测范围，导致仪器无法检测出结果或检测数据不准确。有报道称，Sysmex CA7000血凝分析仪抗高脂乳糜血的能力是通过人为添加干扰剂进行评估的，结果显示高脂乳糜血对检测结果没有影响[3]。我们的结果还表明，高脂乳糜血对APTT和TT的测定影响不大，这与报道一致，但对PT和FIB的测定有明显影响。与手工法测定结果和去脂乳糜血浆测定结果相比，差异有统计学意义(P < 0.438+0)。这可能是由于人为添加干扰物导致浊度增加，与体内脂肪乳糜的性质不同。文献报道去除高脂乳糜的方法有标本放置[2]，低温高速离心[4，5]等。标本放置法耗时长，不能及时发现，延误诊疗时机；低温高速离心对设备要求高，一般实验室不容易配备。室温高速离心去除脂肪性乳糜血浆中PT、APTT、TT和FIB的结果与手工法一致，表明室温高速离心(13 000 r/min离心10 min)去除脂肪性乳糜对血浆中凝血因子活性无影响。室温下的高速离心机很便宜，也很容易在实验室装备。因此，室温高速离心是一种简单易行的消除高脂乳糜对血凝仪测定结果影响的方法。

参考

熊李凡，李。临床基础实验室科学。第三版。北京:人民卫生出版社，1989: 5？7.

王淑娟丛玉龙。今日临床实验室科学[M]。版本1。北京:中国科学技术出版社，1997: 196？198.

[3]程大伟，李玟。CA？1500血凝分析仪的抗干扰功能[J].中华医学检验杂志，1999，22(5):309？311.

崔东升，耿玉兰，何新祥，等.临床乳糜血对凝血检验项目的影响及处理[J].中国凝血杂志.中国血液流变学杂志，2003，13(1):40？41.

陈建云，石凌波，任峰。高速离心对凝血酶原时间测定的影响[J].检验医学，2005，20(4):401？402.