动物抗冻基因的搜索过程
随意回答。一般来说,有两种策略:
1.寻找该物种的耐寒或非耐寒的天然突变体(如果该物种容易被人工突变,也可采用人工诱变),提取两种动物的细胞mRNA,看耐寒或非耐寒个体与正常个体的基因表达谱差异。
现在普遍采用一种偷懒的方法。提取动物细胞的基因组并切割成几个片段,然后连接报道基因以制备表达质粒并转移到动物细胞中。然后用低温诱导的方法。如果一个报告基因在细胞中表达,证明与该报告基因相连的一段dna序列可以在低温下被诱导表达,该基因可能是抗冻基因的启动子。