琼脂糖凝胶怎么制备?

琼脂糖凝胶的制备是分子实验室的一项基本操作,正确操作对整个实验来说是必不可少的。一般流程如下:称重、融胶、倒胶、梳理。

1.称取0.8%和1%我们通常所说的凝胶是指质量体积分数,即琼脂糖粉末的质量克数与加入的TBE缓冲液的体积毫升数之比,即凝胶的浓度。缓冲器的体积取决于橡胶板的尺寸。比如小橡胶片0.8%的胶水需要0.104g琼脂粉和13ml TBE;

2.融化胶水。将称好的琼脂粉和TBE混合在锥形瓶中,在微波炉中反复加热2至3次,直至琼脂粉溶解无气泡;

3.将梳子放入干净的胶槽中,在胶水中加入约1uL的核酸染料,搅拌均匀,待其冷却至不烫手后轻轻倒入胶板中。

4.拔出梳子约20分钟后,轻轻拔出梳子。如果不容易拔出,可以加入适量的TBE缓冲液。