完整的消毒细节
灭菌的彻底性受到灭菌时间和灭菌剂强度的限制。微生物对消毒剂的抗性取决于原始种群密度、菌株或环境赋予菌株的抗性。灭菌是获得纯培养物的必要条件，也是食品工业和医药领域的必要技术。
中文名:灭菌mbth:灭菌专业:农科拼音:mièjn解释:用物理化学方法杀灭微生物适用行业:食品/医学定义、微生物、灭菌原理、基本要求、方法选择、灭菌方法、方法概述、热灭菌、干热灭菌、湿热灭菌、间歇灭菌、辐射灭菌、渗透压灭菌、化学试剂灭菌、特定操作、概述、加热灭菌、过滤灭菌、辐射灭菌、化学灭菌、无菌操作、灭菌参数、干热灭菌、湿热灭菌。定义灭菌是指用物理或化学方法杀灭所有微生物，包括病原性和非病原性微生物及孢子，从而达到无菌保证的水平。灭菌后未被污染的物品称为无菌物品。灭菌后未被污染的区域称为无菌区。《医院感染管理办法》(卫生部令第48号)(2006年)第七章附则第三十六条本办法下列用语的含义: (五)灭菌:杀灭或消除介质中的一切微生物，包括病原微生物和非病原微生物，包括细菌芽孢和真菌芽孢。同时，灭菌也可视为一个过程，因此在GBT19974-2005《医疗保健产品灭菌因素的特性和医疗器械灭菌过程的设定、确认和常规控制的一般要求》中定义如下:3.25灭菌灭菌的过程用于使产品不含活菌。微生物对灭菌的抗性取决于原始种群密度、菌株或环境赋予的抗性。灭菌是获得纯培养物的必要条件，也是食品工业和医药领域的必要技术。杀死或去除培养基、发酵设备或其他目标中所有微生物的营养细胞和孢子，从而实现无菌过程。灭菌原则基本要求重复使用的医疗器械、用具、物品在消毒或灭菌前要清洗干净。被朊病毒、气性坏疽和突发不明原因传染病污染的医疗器械、器具和物品应符合WS/T 367第11章的规定。耐热、防潮的手术器械应先用压力蒸汽灭菌，不得用化学消毒剂浸泡灭菌。环境和物体表面一般先清洁后消毒；当被病人的血液和体液污染时，应先清除污染物，再进行清洗和消毒。医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应当经卫生行政部门批准或者符合相应的标准和技术规范，并遵循批准的范围、方法和注意事项。方法的选择根据污染物品引起感染的风险，选择相应的消毒或灭菌方法:1)高危物品应进行灭菌处理；2)对于中等风险的物品，应采用达到中等水平消毒效果的消毒方法；3)低风险物品应采用低级消毒方法或清洁处理；如遇病原微生物污染，根据物品上污染微生物的种类和数量选择有效的消毒方法:1)对被病原孢子、真菌孢子、分枝杆菌和学者传播的病原体污染的物品，应采用高级别消毒或灭菌；2)对于被病原微生物如真菌、亲水性病毒、螺旋体、支原体、衣原体等污染的物品。，应采用中等水平以上的消毒方法；3)对于被常见细菌和亲脂性病毒污染的物品，应采用中或低水平的消毒方法；4)杀灭受有机物保护的微生物时，应增加消毒剂用量和/或延长消毒时间；5)当被消毒物品上的微生物污染特别严重时，应增加消毒剂的用量和/或延长消毒时间；灭菌方法1)耐热、防潮的医疗器械、用具、物品应首选压力蒸汽灭菌；耐热油和干粉要用干热灭菌；2)对耐热、防潮的物品，应采用环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌或低温甲醛蒸汽灭菌等低温灭菌方法；3)物品表面消毒时，应考虑表面性质，光滑表面应用合适的消毒剂擦拭或用紫外线消毒器近距离照射；多孔材料表面应采用浸泡或喷洒的方法进行消毒。方法总结常用的灭菌方法，如化学试剂灭菌、辐射灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤灭菌。根据不同的需要，可以采用不同的方法，如介质灭菌采用湿热灭菌，空气采用过滤灭菌。热杀菌热杀菌利用高温使微生物细胞内的蛋白质全部变性，酶活性消失，导致细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌法。干热灭菌火焰燃烧法或烘箱内热风灭菌法称为干热灭菌。将金属器械或清洗干净的玻璃器皿放入电烤箱中，在150 ~ 170℃下保持1 ~ 2小时，以达到彻底灭菌(包括细菌芽孢)的目的。焚烧或燃烧是最彻底的干热灭菌方法，其应用范围仅限于接种环和针的灭菌或带有致病菌和动物尸体的物料的焚烧。湿热灭菌是通过沸水、蒸汽和蒸汽压力进行灭菌。巴氏杀菌法:最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒，因此得名。这是一种专门针对牛奶、啤酒、果酒或酱油等不适合高温杀菌的液体风味食品或调味料的低温消毒方法。巴氏杀菌是湿热灭菌，有两种方式:①经典的低温灭菌法(LTH):在665±438+0.7 ~ 62.8℃处理30分钟；②现代高温瞬时法(HTST):在765438±0.6℃或稍高温度下处理65438±05分钟。上述方法中，蒸汽压力灭菌效果最好，可采用常压蒸汽或高压蒸锅(一般为1 kg/cm2)灭菌，蒸汽温度可达121℃，可在30分钟内杀灭所有耐热芽孢。但对于一些容易被高压破坏的物质，如一些糖类或有机含氮化合物，以0.6 kg/cm2 (110℃)的压力灭菌15 ~ 30分钟为宜。煮沸消毒法:饮用水消毒一般采用100℃煮沸几分钟。间歇灭菌间歇灭菌是一种每天一次，连续3天的蒸汽灭菌方法。这种方法适用于不能承受100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般用蒸汽在正常大气压下灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃，不会对糖等物质造成破坏，但能杀死间歇培养时萌发的孢子，从而达到彻底灭菌的目的。辐射灭菌辐射灭菌是一种在一定条件下通过辐射进行灭菌的方法。常用的有紫外线，还有的是电离辐射(射线加速中子等。).波长在25000-80000纳米之间的激光也有很强的杀菌能力，26500纳米的波长最有效。辐射灭菌仅限于某种材料，由于所需设备复杂，难以广泛应用。渗透压灭菌渗透压灭菌是一种用高渗透压溶液灭菌的方法。在高浓度的盐或糖溶液中，细胞因脱水而与质壁分离，不能进行正常的代谢，导致微生物死亡。用化学试剂灭菌大多数化学试剂在低浓度时有抑菌作用，高浓度时有杀菌作用。常用的有5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇。化学消毒剂必须是挥发性的，以便去除灭菌材料上的残留药物。化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢物(磺胺类等。)，抗生素和生物制药。抗生素是微生物或其他生物在生命活动过程中合成的次生代谢产物或人工衍生物。它们可以抑制或感染其他生物的生命活动(包括病原体、病毒、癌细胞等。)在非常低的浓度下，因此它们可以用作优秀的化疗剂。具体操作概述灭菌可称为去除或杀死一种物质中的所有微生物。就一般的灭菌方法而言，根据微生物的种类、污染情况以及被污染物品的性质和状态，可单独使用或联合使用以下灭菌方法。是否达到灭菌通常通过无菌试验来判断。必须确认灭菌操作过程中的温度和压力是否适合灭菌条件。灭菌条件选定后，应确认灭菌效果，以确保所用的各种灭菌条件适合待杀灭的目标菌。加热灭菌采用加热灭菌法。在规定的温度、压力等灭菌条件下，需要一定的加热时间。由于灭菌物品的性质和灭菌容器的容积不同，灭菌时间从所有容器达到规定温度的时间开始计算。1，火焰灭菌，是一种利用火焰加热杀灭微生物的方法。这种方法主要以气体为基础，用于磁性和金属的制造以及在火焰中不会损坏的物品。在喷灯或酒精的火焰中加热时间通常在两秒钟以上。2.干热灭菌是用干热空气加热杀灭微生物的方法。该方法以气体为主，用于磁性和金属物品、纤维物品、矿物油、脂肪、油脂、实验药物、固体药物等耐高温物品；气体和电能直接加热空气，加热后的空气循环流动，保持干燥和高温。通常，灭菌在以下条件下进行。135℃~ 145℃3 ~ 5小时；160℃~ 170℃2 ~ 4小时；180℃~ 200℃0.5 ~ 1小时；200℃以上0.5小时以上。药品、水溶液等。放入密封的容器中。这些物品耐高温，用134℃ ~ 138℃的热风加热3分钟以上即可灭菌。3.高压蒸汽灭菌是通过加热适当温度和压力的饱和蒸汽来杀灭微生物的方法。该方法以气体为热源，用于磁性、金属、橡胶、纸和纤维制品、水、培养基、实验药物、实验液体和药液等的灭菌。简而言之，用于耐高温高压水蒸气的物品。为了达到灭菌的目的，操作时要将灭菌容器中原有的空气排除在排气之外，灭菌时高压蒸汽必须充满。灭菌通常可以在下列条件下进行。115℃(0.7kg/cm2；)30分钟；121℃(1.0kg/cm2；)20分钟；126℃(1.4kg/cm2；)15分钟。4.循环蒸汽灭菌法，利用直接加热的循环蒸汽杀灭微生物。在该方法中，使用气体作为热源来对磁性、金属、橡胶和纤维物品、水、培养基、测试药物、测试液体和液体药物进行消毒。用干热灭菌或高压蒸汽灭菌，物品有变质的危险，所以在100℃的循环蒸汽中灭菌需要30 ~ 60分钟。5.煮沸灭菌是一种在沸水中加热杀灭微生物的方法。在该方法中，使用气体作为能源来对由磁性、金属、橡胶和纤维制成的物品、水、培养基、试验药物、试验液体和液体药物进行消毒，并且通过干热消毒和高压蒸汽消毒消毒的物品有变质的危险。所以为了增加杀菌效果，可以在开水中加入1-2%的碳酸氢钠。物品浸泡在沸水中灭菌时，煮沸时间应大于15分钟。6、分步灭菌，是利用80℃~ 65438±000℃的水或循环蒸汽，24小时为一个循环，每30 ~ 60分钟重复加热3-5次；用于杀死微生物的主要方法。60℃ ~ 80℃的水反复加热也是一种间歇式低温灭菌方法。该方法主要用于橡胶制品、培养基、实验药物、液体和液体药物等。过滤灭菌过滤灭菌是一种常用的灭菌方法，即通过过滤材料的筛选或吸附等物理手段去除微生物。对于不耐热液体，过滤是唯一实用的灭菌方法。过滤器可分为两类:深层型和筛分型。深层过滤主要取决于滤料的深度，通过机械捕捉或随机吸附的方式进行过滤。大多数过滤材料都属于这种类型。筛网过滤器物理筛选液体或气体。有些需要灭菌的物料是不能加热的，比如很多维生素溶液。因此，许多液体可以通过过滤来灭菌。过滤不会杀死微生物，而是将它们排除在外。过滤灭菌用的设备有两种，一种叫深层过滤器，如烧结玻璃、无釉陶瓷颗粒或石棉压制的滤板，另一种是过滤膜。深层过滤器已经使用了100多年，有逐渐被膜过滤器取代的趋势。但由于大量的沉淀物容易堵塞膜过滤器，一般采用深度过滤先去除大颗粒。过滤膜通常由合成纤维材料制成，例如醋酸纤维素、硝酸纤维素、聚碳酸酯和聚偏二氟乙烯。滤膜的孔径一般为0.2微米，可以滤除大部分微生物的营养细胞。过滤法最大的缺点是不能过滤掉病毒。整个方法主要用于气体、水、含有可溶性和不稳定物质的培养基、试验液和药液。常用的过滤装置有薄膜过滤器、磁性过滤器、玻璃纤维过滤器等。辐射灭菌1，辐射灭菌，包括放射性同位素，是利用放射源产生的伽马射线杀灭微生物的方法。这种方法主要用于玻璃制品、磁性制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品和纤维制品等防辐射物品。常用的放射源有60CO、137C5等。根据待灭菌物品的材质、性质和污染状况，调整辐照母线的量，以达到灭菌的目的。2.紫外线杀菌是一种通过照射紫外线杀死微生物的方法。这种方法主要用于玻璃制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品和纤维制品等。，也可用于设施、设备、水或药品等。这些物品对紫外线有很好的耐受性。通常，一般应用200-300 nm的紫外线。3.高频灭菌是一种利用高频热量照射直接杀灭微生物的方法。这种方法主要用于水、培养基、试验液、药液等能承受高频辐照的物品。通常使用915或2450兆周的频率。化学灭菌1，气体灭菌，一种利用环氧乙烷或甲醛杀灭微生物的方法。这种方法主要用于玻璃制品、磁性制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品、纤维制品等。、以及用于设施、设备或粉末状药物等。当使用气体灭菌时，作为先决条件，灭菌物品不会变质。2、药液灭菌法，是一种用药液杀灭微生物的方法。该方法主要用于玻璃制品、磁性制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品、纤维制品等的灭菌。，也可用于手指、无菌箱或无菌设备等的消毒。，药液灭菌用于未变质的物品。常用的有乙醇(酒精)0.1-1w/v%盐苯溶液、甲酚、酚水或福尔马林水等。灭菌后的无菌操作，上述使用过的器械或材料应在无菌箱或无菌设备中灭菌。以上灭菌方式主要用于药品的配制、灌装、封口等工艺操作，操作速度快。265438+20世纪的先进技术是300-600Mpa超高压灭菌。国际公认该技术应用设备昂贵，我国主要依赖进口，造成了超高压技术应用的瓶颈。国内鲜有企业开始生产超高压设备，预计2012年进口贵的瓶颈将被打破。灭菌参数灭菌设备的验证是通过相关参数来验证灭菌方法的可靠性。1，D值D值是指在一定温度下杀灭90%微生物(或残留率为10%)所需的灭菌时间。在一定的灭菌条件下，不同的微生物有不同的D值。同一种微生物在不同的灭菌条件下，D值不同。因此，d值随微生物种类、环境和灭菌温度而变化。2.Z值Z值是指将灭菌时间减少到原来的1/10或在相同的灭菌时间内杀死99%的微生物所需增加的温度。3.F值F值是当给定z值产生的灭菌效果与参考温度(T0)下给定z值产生的灭菌效果相同时，在某一温度(t)下的等效灭菌时间，单位为min。f值常用于干热灭菌。4、F0值F0值是一定的杀菌温度(T)，Z为10℃时产生的杀菌效果与Z为121℃时产生的杀菌效果相同(分钟)。也就是说，无论温度如何变化，在121℃下，t分钟的杀菌效果相当于F0分钟。F0仅用于湿热灭菌。干热灭菌(1)干烤:使用干燥箱，在160 ~ 180℃加热2小时，可杀灭所有微生物，包括孢子。主要用于玻璃器皿和瓷器的灭菌。
(2)烧灼法和焚烧法:烧灼法是直接利用火焰杀灭微生物，适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属设备的灭菌。焚烧是一种彻底的消毒方式，但仅限于废弃污染物的处理，如无用的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用焚烧炉中进行。
(3)红外:红外辐射是波长为0.77 ~ 1000微米的电磁波，具有良好的热效应，尤其是波长为1 ~ 10微米的电磁波。它也被认为是一种干热灭菌。红外光是由红外灯泡产生的，不需要空气传导，所以加热速度快，但是热效应只能在被照射的表面产生，所以不能均匀加热一个物体。红外线的灭菌效果与干热相似，红外线烘箱灭菌所需的温度和时间也与干烘相同。主要用于医疗器械的灭菌。
长时间接触红外线的人会感到眼睛疲劳、头痛；长期辐射会造成眼内损伤。因此，工作人员至少应该戴上能够防止红外线伤害的防护眼镜。
(4)微波:微波是波长约为1m ~ 1m的电磁波，频率较高，能穿透玻璃、塑料薄膜、陶瓷，但不能穿透金属表面。微波能使介质中混乱的极性分子在微波场的作用下按波的频率来回运动，相互碰撞摩擦产生热量，介质的温度也能相应升高，因此能在较低的温度下起到消毒作用。一般认为其杀菌机理除热效应外，还有电磁振动效应和场力效应的作用。消毒常用的微波有两种:2450MHZ和915MHZ。微波辐射主要用于食品加工。可用于医院无菌病房的实验室用品、非金属器械、食具、药杯等用品的消毒。
长期微波照射可引起眼睛晶体混浊、睾丸损伤、神经功能障碍等全身反应，因此在开始手术前必须关上门。湿热灭菌(1)煮沸法:100℃煮沸5分钟，可杀灭一般细菌的繁殖体。很多孢子需要煮沸5-6个小时才会死亡。在水中加入2%的碳酸钠可以使水的沸点提高到105℃。既能促进杀灭孢子，又能防止金属器皿生锈。煮沸法可用于饮用水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。).
(2)循环蒸汽灭菌法:使用100℃左右的蒸汽进行消毒，一般使用循环蒸汽灭菌器(原理相当于我国的蒸笼)，加热15 ~ 39分钟，即可杀灭细菌繁殖体。消毒物品的包装不能太大或太紧，以利于蒸汽渗透。
(3)分级灭菌:蒸汽反复循环，达到灭菌的目的。一般使用蒸汽灭菌器，在100℃加热15 ~ 30分钟即可杀灭传播体。但仍有孢子残留。取出后放入37℃培养箱过夜，使孢子发育成繁殖体，第二天再蒸一次，连续三次以上。该方法适用于不耐高温的营养物质(如血清培养基)的灭菌。
(4)巴氏杀菌法:利用热量杀灭液体中的致病菌或一般杂菌而不严重损害其品质的一种食用方法。它是巴斯德为了给酒精消毒而发明的，因此得名。加热61.1 ~ 62.8℃半小时，或71.7℃ 15 ~ 30分钟。常用于消毒牛奶和酒精。
(5)高压蒸汽灭菌法:高压蒸汽灭菌是在专用的高压蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中应用最广泛、最可靠的方法。它的优点是穿透力强，杀菌效果可靠，能杀死所有微生物。
使用的压力灭菌器可以分为两类:低排气压力灭菌器和预真空压力灭菌器。适用于高温、耐水物品的灭菌。