当高保真酶pcr基因片段时，不同的cr产生不同的长度。原因是什么？

常见的高保真酶有Pfu和Pfu Ultra，但我用过最好的高保真酶是Phusion。

因为一般高保真酶具有核酸外切酶活性，虽然保真度提高了，但扩增效率会降低，所以使用Pfu时，扩增时间往往比Taq酶长，Pfu Ultra更好。但Taq酶P有条带是必然的。如果换成高保真酶，直接P可能没有结果，或者条带很弱。

Phusion最好，保真度可能是Taq酶的50倍左右，而且太强，基本没有p。