DNA测序仪原理

Abi prism 310基因分析仪(即dna测序仪)采用毛细管电泳技术代替传统的聚丙烯酰胺平板电泳，并使用公司专利的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止子法)，因此通过单引物pcr测序反应，生成的pcr产物是3 ' ' '端有四种不同荧光染料的单链dna混合物，相差1个碱基，这样四种荧光染料的测序pcr产物就可以在毛细管中电泳，避免了泳道和之间迁移率差异的影响由于分子大小不同，毛细管电泳中的淌度也不同。当分子通过毛细管读数窗时，激光检测器窗口中的ccd(电荷耦合器件)摄像检测器可以逐个检测荧光分子。激发的荧光被光栅分割，以区分代表不同基底信息的不同颜色的荧光，图像在ccd相机上同步。分析软件可以自动将不同的荧光转换成dna序列，从而达到dna测序的目的。分析结果可以以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图谱或碱基排列顺序等多种形式输出。

它是一种用计算机自动控制，如自动灌胶、自动取样、自动数据采集和分析，测量dna片段碱基序列、大小和定量的高级精密仪器。Pe还提供凝胶聚合物，包括dna测序凝胶(pop 6)和genescan凝胶(pop 4)。这些凝胶颗粒的孔径大小均一，避免了凝胶制备条件不一致对测序准确性的影响。主要由毛细管电泳装置、macintosh电脑、彩色打印机和电泳配件组成。计算机包括用于数据收集、分析和仪器操作的软件。它采用最新的ccd摄像检测器，将dna测序缩短至2.5h，pcr片段大小分析和定量分析为10 ~ 40分钟。

由于仪器具有dna测序、pcr片段大小分析和定量分析功能，可以进行dna测序、杂合子分析、单链构象多态性分析(sscp)、微卫星序列分析、长片段pcr、rt-pcr(定量pcr)等分析。除了常规的dna测序，它还可以进行单核苷酸多态性(snp)分析、基因突变检测、hla配型和法医学。