如何确定尿液中的成分？
我提取了其中一个。
尿沉渣的检查也叫尿沉渣的检查，是将新鲜尿液离心，然后用显微镜检查尿沉渣的一种检查方法[1]。由于仪器分析的发展，现代尿液可见成分可以通过非离心、激光荧光染色、流动分析，(Sysmex UF50，UF100)或计算机图像自动识别系统(Iris IQ200)进行检测，因此也可以称为尿液中的颗粒分析[2]。目前，我国大多数医院实验室仍习惯于传统的普通显微镜检查方法。由于尿液中有许多可见成分，如细胞、管状物、微生物、晶体等，为了进一步识别和鉴定这些成分，有相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、干涉显微镜、电子显微镜等，可分为染色法和非染色法。非染色检验是最简单和最常用的检验方法。尿液有形成分检查的重要性在于，它是尿液分析中不可缺少的检查方法，对临床诊断、治疗监测和健康调查具有重要的临床意义。可以确定进入尿路的细胞类型，如红细胞增多症，提示尿路出血，进一步检查红细胞形态有助于确定出血来源于肾小球还是下尿路。白(脓)细胞增多提示尿路感染；不同尿路上皮细胞的增殖有助于判断各种尿路病变的部位；管型增多常提示肾小球肾炎、肾小管(远端和集合管病变)和肾功能不全；发现代谢的结晶或药物来源也有很大的临床价值[3]。
一、尿液有形成分检验方法
有很多方法可以检查尿液的形成。以下是对8种比较选择方法要点的简要说明:
1.传统离心法:1997国家临床检验操作规程[4](第二版)明确规定了非染色尿沉渣和染色尿沉渣镜检的操作规程，但在操作中未规定离心机的类型，仅规定1500r/min离心5分钟，未规定尿滞留时间、检验时间、结果判定和报告方法。显微镜观察10×10保管型、10×40、10视野显示细胞的最低值和最高值，观察管型用高倍显微镜鉴定，但计数数用低倍显微镜观察20个视野，计算一个视野的平均记录结果。提交人检查了三级、二级和初级医院的尿检记录。有些医院将尿杯或试管中的尿沉渣直接倒在载玻片上(无盖)，不采用定量的玻璃板计数进行报告，而报告仍采用传统的加号(-、+、++、++、++++)，管型和上皮细胞不分类，报告一点点、+、++。病房尿往往可以在检查前几个小时留置(规定明确规定早上空腹6550)。应在1h内送检)这种传统方法随意多变，受操作者主观性影响，判断不规范，结果不一致，没有可比性。因为报告方法因人而异，是一种缺乏规范的实验方法，应该淘汰。
2.标准镜检法:针对上述情况，中华医学会检验学分会临床检验组于2002年召开了三次尿镜检标准化会议，提出了尿沉渣检验标准化的建议[5]。建议明确规定尿沉渣检查的材料和仪器、标本、收集和运输、操作步骤及尿沉渣报告内容。比如容器、离心管、尿沉渣计数板、离心机(卧式)的相对离心力要在400×g左右，而显微镜要求内置光强可调的光源，要有40倍、10倍的物镜和10倍的目镜。标本的收集、运输和接收有明确的规定。此方法适合在各级医疗单位推广，加快读-10或Kova板即可完成。由于操作统一，结果准确，报告一致，是一种值得推荐的尿沉渣检查方法。问题是如何建立质量保证体系，进行室内质量控制，密切联系临床和心室间质评，定期进行沉渣专业培训，使尿沉渣鉴定熟练，不遗漏病理有形成分的要求[5]。
3.尿液有形成分染色法:尿液有形成分染色的作用是:(1)防止血栓渗漏；(2)防止误诊；(3)防止长时间显微镜检查引起的疲劳；(4)为尿液中典型病理成分的长期保存创造条件，为教学和科研提供图谱。尿液有形成分的染色体方法可分为:①单一染色法；②复合染色；③活体染色；④差异染色；⑤特殊染色等[6]。日本伊藤推荐了一种标准的尿液采集方法和四种染色方法。NCCLS公布的尿液检查方案Gp16A[7]中提到“染色法对细胞和管型的鉴别很有帮助”，提倡马尔宾染色(结晶紫和沙黄法)和0.5%甲苯胺蓝。同时列举了鉴别尿液万分之一的特殊染色方法:①脂肪和椭圆形脂肪体:油红或苏丹红ⅲ；②细菌:革兰氏染色和巴氏染色[7]。欧洲尿液分析组引用Sternheimer染色法，阿尔辛-蓝-派罗宁B)[2] b [2]优于Sternheimer-Malbin染色法。我们的尿液实验室也证实了S染色可以弥补S-M染色的缺点，是六种染色方法中最好的一种[8]。
4.尿液中的颗粒过滤法:可将一定量的尿液(20~100ml)通过特制的过滤网过滤并将管型、细胞等病理颗粒保留在过滤网上[10]，部分红细胞可通过过滤网置于电镜下观察[11]。我们在德国波恩大学医院泌尿外科实验室也看到过带专用注射器和过滤器的商业产品。可惜因为滤网必须染色鉴定，染色后有些细胞溶解，而且这种方法价格昂贵，所以很难普及[12]。
5.细胞计数池上不离心计数尿液的快速筛分法:直接将不离心的尿液放入尿液细胞计数池中是国家临床检验操作规程中介绍的一种定量过滤方法，欧洲不推荐。因为结果不敏感，不规范，所以结果不稳定[2]。但笔者曾经在上海市第六人民医院纽鲍尔改进的血细胞计数池中观察到5个细胞×2，很快就能得到实验结果。泌尿科医生认为有利于观察病情，判断疗效和病情的走向。但在国外，强调用浓度为0.2mm(总面积为0.0625mm2)的富克斯-罗森塔尔板进行全液体检查，视野开阔，结果更准确可靠[2]。
6.尿沉渣工作站:工作站集成了摄像显微镜、尿沉渣计数板和计算机，如Plyson AMP-2000U、华信DiasysR/S、合肥新月SQ-3000、美德泰增洋、重庆天海US2020、北京国联在线QO-S染色尿沉渣分析仪、钱胜QS8005过程尿沉渣分析仪。包括标准移动计数室，各种键盘控制\标准条码识别，自动清洗，自动采样，报告时可复制一张视野图)。无论是哪个厂家生产的尿沉渣工作站，都要强调标准化，即留尿样量、离心力、离心时间、沉淀物滞留、显微镜镜头(最好带相差镜头)、报告方法等都要符合标准显微镜的要求。这种方法的优点是计算机报告。清洁移动电脑板，需要去除蛋白质污垢，完全自动计数识别，避免主观因素。
7.荧光染料流式细胞仪:Sysmex公司生产的UF50和UF-100尿沉渣流式细胞仪，利用沉渣中可见成分DNA与细胞膜和菲啶、羰基氰两种荧光染料接触，然后通过鞘流进行激光照射，各须成分产生前向散射光强和荧光脉冲宽度，再通过电阻抗测量红细胞和血细胞大小散点图和直方图。该仪器可自动报告红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌五个定量参数，小圆上皮细胞、霉菌、病理管型、晶体、精子五个定性参数，还可测量尿液电导率。由于不需要离心，检测速度快，病理成分的灵敏度和重复性好，由于每个尿样的检测步骤模式一致，便于质量控制(用标准检测颗粒)和标准化。如果与干化学试纸结合，还可以通过计算机处理观察两者的符合程度，在血尿的临床诊断、尿路感染的判定、肾功能的了解等方面得到了重视。仪器的缺点是价格高，不能检测滴虫、脂肪滴、病理和药物结晶，也不能识别病毒包涵体或肿瘤细胞；当尿液中有大量细菌、酵母、晶体等颗粒时，可干扰红细胞计数结果；图像中无法识别阴影红细胞和各种病理管型[13]。
8.体外诊断尿液成像系统——全自动智能显微镜(AIM): 1983黄色虹膜显微镜工作站是IRIS公司引进的，尿液中的各种颗粒在AIM上成像，经计算机处理后显示在荧光屏上。2000年，公司引进了改良的大型939UDX全自动尿液分析仪，并于2002年通过了美国美国食品药品监督管理局(FDA)认证的小型IQ-200系统。包括专利的免载玻片显微镜和独特的高速代码软件，我们可以轻松查看尿液中的各种常见泪液，即白细胞、白细胞、红细胞、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、透明管型、未分类管型、晶体、细菌、酵母、精子和粘液。鉴定结果可以根据操作者的需要进行修改，以区分尿液中可见成分的亚型。IQ-200在原理上是先进的。它集成了尿液中各种颗粒的大小、对比度、形状、纹理等技术参数，由高灵敏度的计算机判断颗粒的性质。据初步报道，IQ-200的总体灵敏度为83%(其中红细胞89.4%，白细胞93.9%，细菌93.9%)。总体特异性为83.3%(其中红细胞89.2%，白细胞88.8%，细菌88.1)。用IQ-200显微镜复检率可以低于5% (UF往往在20%以上)，但是否需要用这种方法进一步鉴别各种细胞管型，如用汉逊染色嗜酸性粒细胞，用苏丹红ⅲ染色脂肪管型等，一直没有解决。该仪器小巧便携，屏幕上显示多种病理颗粒和相关质控颗粒。但在该仪器中没有发现压力鞘流系统，缺乏直观的染色数据。厂家在展会上建议将456个尿样与UF-100进行比对。IQ-200发现14病理管状UF-100检出65438+。
二、尿液有形成分的鉴定
尿液中的成分超过45种，比较常见。
1.红细胞:尿液中典型的红细胞呈双凹圆盘状，淡黄色，直径约8um，易于识别。然而，由于尿液颗粒的复杂性和多样性，尿液红细胞可能会因高温、长时间、pH值变化和渗透压变化而发生形状变化。无经验的检验人员应将其与酵母样真菌、真菌孢子、脂肪滴、淀粉颗粒、草酸钙晶体、尿酸盐晶体和精子头区分开来。通过测试。
2.白细胞:尿液中的细胞以中性粒细胞为主，偶见单核细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞。新鲜尿液中白细胞外观完整，圆形直径65，438+00um ~ 65，438+04um，胞浆内颗粒可见，细胞核清晰，常呈散在状。在低渗和碱性尿中，白细胞常膨胀，约有一半可在2h内溶解，而在高渗和酸性尿中。老尿中的白细胞血浆因匀浆而呈胶状。发炎时，变性的白细胞大多外观不规则，结构模糊。细胞质内可充满粗颗粒，核结构不清。细胞常粘在一起，细胞界限不清，称为脓细胞。白细胞可分为:(1)重染细胞:染色深的老化或死亡白细胞；(2)浅染细胞:浅染的细胞为活性白细胞，尿比重> 1015时可见；(3)闪光细胞:在低渗尿中，中性粒细胞变大，分子在细胞质中移动。光线折射时可以看到闪光现象。3.管型:是尿液有形成分中的重要成分，其数量和类型构成对肾实质病变的诊断、治疗观察和后判断有一定价值。三种常见的细胞管型是红细胞管型、肾小管上皮细胞管型和肾小管上皮细胞管型。