吴乃虎的研究课题
1.水稻光周期育性转换调控基因的分离和功能鉴定完成了水稻osRACD基因的结构分析,表明它由6个内含子和7个外显子组成。通过体外缺失突变和凝胶阻断实验,在osRACD基因的启动子中鉴定出与特异性转录因子结合的顺式元件,并证明该特异性转录因子仅存在于可育材料58S-SD的幼穗组织蛋白提取物中。利用反义基因和转基因技术,证明osRACD基因具有控制花粉管生长发育的功能。分离出水稻Rac家族的另一个成员osRACB,全序列测定和结构分析表明其由6个内含子和7个外显子组成,并构建了正义和反义基因表达载体。
2.甜菜无融合生殖基因的分离和功能鉴定。与德克萨斯A&M大学华裔教授张红彬博士合作,构建了天才单倍体附加系M14 biBAC文库,平均插入片段MW为120 KB。构建了与繁殖和栽培甜菜相关的甜菜单体附加系消减文库。九个甜菜易位系已被成功鉴定。建立了用于转基因功能鉴定的杂交甜菜组织培养体系。
3.利用PCR技术提高C3植物水稻光合效率的研究磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)基因已从C4植物高粱中分离出来,其转录本约为5989bp。构建了转基因表达载体pCAMBIA1301,建立了相应的水稻转化体系,获得了含PEPC基因的水稻植株。
4.胡萝卜体细胞胚根系发育的细胞分子生物学研究在已有研究的基础上,今年我们继续在胡萝卜体细胞胚发育中蔗糖的调控机制、胚根生长调控相关基因的分离、内源ABA诱导的Lea基因等方面进行深入研究。Lea基因Hsp70基因、translin基因和DnaJ基因已经被分离出来,它们的功能正在研究中。