聚合酶链反应技术的建立

科兰纳(1971)等人首先提出了体外核酸扩增的思想:“经过DNA变性,用合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,重复这个过程,就可以合成tRNA基因。”

但由于当时基因序列分析的方法还不成熟,耐热的DNA聚合酶还没有报道,引物合成困难,这个想法似乎没有实际意义。此外,20世纪70年代初分子克隆技术的出现提供了克隆和扩增基因的方法,因此科兰纳的想法被遗忘了。

1985年,在塞特斯公司工作时,Kary Mullis发明了PCR。穆利斯想要合成DNA引物用于测序,但他经常担心没有足够的模板DNA。

1983年4月的一个周五晚上,他正开车去他的乡间别墅,突然脑中闪过“聚合酶链式反应”的念头。

从1983到65438+2月,Mullis通过同位素标记在10循环后看到了第一个长度为49 bp的PCR片段。

10月25日,1985,1987申请了PCR的专利,于7月28日获得批准(专利号:4683202),穆利斯是第一发明人。

1985 65438+2月20日在Science杂志上发表了PCR的第一篇学术论文,Mullis是合著者。

1986年5月,穆利斯在冷泉港实验室做了一个专题报告,全世界都开始学习PCR的方法。