为什么普通聚合酶能扩增,高保真酶pfu却不能? 退火温度为72℃。注意Pfu酶的延伸速度低于Taq,请适当延长延伸时间。还要注意系统中是否添加了镁。尝试将酶浓度加倍。如果没有,换一管酶。你试过改变酶吗?