免疫学检查的常用技术有哪些？

1.免疫荧光技术

免疫荧光技术是利用荧光素标记的抗体(或抗原)检测组织、细胞或血清中相应抗原(或抗体)的方法。荧光抗体因其安全、灵敏而被广泛应用于免疫荧光检测和流式细胞术中。根据荧光素标记方式的不同，可分为直接荧光抗体和间接荧光抗体。标记间荧光抗体中的第一抗体不直接连接荧光素，而是先将第一抗体与蛋白质结合，再将带有荧光素的第二抗体与第一抗体结合。通过二抗的结合，可以放大信号，因此可以在一定程度上提高检测的灵敏度，但高背景也降低了检测的特异性。近年来，随着荧光素和荧光检测技术的不断进步，荧光检测的灵敏度已经接近同位素检测的水平，直接标记的荧光抗体已经逐渐取代间接标记的抗体。这些荧光素标记的抗体直接与抗原结合，大大提高了检测的特异性，使检测结果更加准确可靠。随着荧光检测技术的发展，免疫荧光技术已广泛应用于感染性疾病的诊断，如检查细菌、病毒和螺旋体感染疾病中的IgM抗体，作为近期接触抗原的标志。用单克隆荧光直接标记抗体鉴定淋巴细胞亚型。通过流式细胞术，不同的荧光抗体可用于用细胞表面的不同抗原对同一细胞进行染色。

2.放射性免疫测定

放射免疫分析是目前最敏感的检测技术。用放射性同位素标记抗原(或抗体)，然后与相应的抗体(或抗原)结合，确定抗原抗体结合物的放射性检测结果。放射性同位素具有pg级的灵敏度，微量物质可以通过反复照射进行定量检测。但是放射性同位素对人体的伤害也限制了这种方法的使用。

3.酶联免疫吸附试验(ELISA)

酶联免疫吸附试验是目前应用最广泛的免疫分析方法。该方法结合了酶的特异性、抗原抗体反应和酶催化底物的作用，根据酶作用于底物后颜色的变化来判断检测结果，其灵敏度可达ng级。常用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。酶联免疫吸附试验(ELISA)因其不需要特殊仪器、检测简单而被广泛应用于疾病检测。常用的方法有间接法、夹心法和BAS -ELISA。间接法是先将待测蛋白盛在孔板中，然后依次加入一抗、酶标二抗和底物，用仪器(如酶标仪)定量检测抗原。该方法操作简单，但由于背景较高，特异性较差。目前已逐渐被三明治法取代。夹心法利用两种一抗捕获并固定目标抗原，在保证灵敏度的同时，大大提高了反应的特异性。近年来，抗原的定量检测技术也在不断创新。近年来，基于夹心ELISA发展了多抗原检测试剂盒，可以同时检测微量液体样品中多种抗原的含量。该技术的应用大大缩短了诊断时间，提高了诊断的可靠性和及时性。

4.免疫胶体金技术

经过30多年的发展，胶体金技术日趋成熟。这种方法是用胶体金颗粒标记二抗，最后利用抗原和抗体的特异性反应，将标记了胶体金的二抗吸附在滤膜上。该方法简单、快速，可广泛用于临床筛查。